NKM-1人白血病細胞 含STR鑒定

簡要描述：待細胞穩定后，調回PBS量10%，對于初次實驗者，一般細胞培養，都需要加入雙抗防止細胞污染，細胞匯合度達到90%，我們開始寄送，這樣可以保持細胞收到時，良好的細胞活力。

更新時間：2022-07-19

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NKM-1人白血病細胞 含STR鑒定

【中文縮寫】A3

【中文名稱】A3人T淋巴白血病細胞

【背景資料】 見細胞說明書

【產品來源】 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國內外著名大學建系

"公司提供貼壁、半貼壁、懸浮、半懸浮、貼壁與懸浮混合等細胞特性，一般細胞培養PBS量是10%，如果出現細胞狀態不良情況，可以提高PBS量到15%，SHEE人永生化食管上皮細胞待細胞穩定后，調回PBS量10%，對于初次實驗者，一般細胞培養，都需要加入雙抗防止細胞污染，細胞匯合度達到90%，我們開始寄送，這樣可以保持細胞收到時，良好的細胞活力。

一、售前
         上海青旗生物專業為國內科研提供高品質細胞和優質服務，QC檢測合格后發貨保證細胞狀態良好，發貨前保證質量。
 
二、售后
         收到細胞7天內出現狀態不佳等情況請及時反饋，會有技術同步指導操作協助解決，如仍未養活免費重發。建議及時保種，有備無患！
 
三、細胞生長條件：

 
四、細胞收到后處理
    細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的zui好辦法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的*培養液移入廢液缸中，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養液，懸浮細胞需離心處理，放入37℃、5%CO2孵箱培養；超過80%匯合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養步驟。
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五、細胞培養步驟
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中，加入約6ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
一，燒瓶培養的處理程序 在培養瓶中接種細胞并在培養基中*填充培養基以防止運輸過程中細胞的丟失。 1、收到后，目視檢查培養物是否有微生物污染的宏觀證據。 使用倒置顯微鏡（配備有相位傳感器），仔細檢查是否有微生物污染的證據。還檢查以確定大多數細胞是否仍然附著在燒瓶底部？在運輸過程中，培養物有時被粗略地處理，并且許多細胞經常分離并懸浮在培養基中（但仍然是可行的）。 2、如果細胞仍然附著，無菌去除5至10毫升的運輸介質?？梢怨澥∵\輸媒介以重復使用。在5%℃的空氣中，在37℃下培養細胞，直到它們準備進行傳代培養。 3.如果細胞沒有附著，無菌地移除燒瓶的全部內容物，并以1000rpm離心5至10分鐘。取出運輸介質并保存。在10毫升這種培養基中重新沉淀顆粒細胞并加入25厘米的燒瓶中。在空氣中5%℃下，在37℃下孵育，直至細胞準備進行傳代培養。   二、傳代程序 體積為75厘米的燒瓶。增加或減少其他尺寸培養容器所需的分離培養基的量。 1、去除和丟棄培養基。 2.用0.25%(w/v)胰蛋白酶0.53mM EDTA溶液沖洗細胞層，除去所有含有胰蛋白酶抑制劑的血清痕跡。 3.添加2.0~3.0 ml胰酶-EDTA溶液瓶中，倒置顯微鏡下觀察細胞到細胞層分散（取決于胰蛋白酶的批）。 注意：為了避免結塊，不要在擊打或搖晃瓶子時攪拌細胞，等待細胞分離。難以分離的細胞可以放置在37°C以促進擴散。 4、加入6～8毫升的完整生長培養基，輕輕吸液，抽吸細胞。 5、在新培養容器中加入適當的細胞懸液等分試樣。 6、培養37°C培養基。 推薦栽培比為1:3∶1:4。 介質更新：每周2至3次   三、冷凍保存程序 該協議使用量在75平方厘米的瓶；比例減少或增加的其他尺寸的分離介質的培養容器的數量。 1、去除和丟棄培養基。 2。簡要沖洗細胞層0.25（w/v）trypsin0.53mm EDTA溶液去除所有痕跡血清含有胰蛋白酶抑制劑。 3。加入2至3毫升的胰蛋白酶-EDTA溶液瓶中，倒置顯微鏡下觀察細胞到細胞層是分散的（通常在1到10分鐘）。 注意：為了避免結塊，不要在擊打或搖晃瓶子時攪拌細胞，等待細胞分離。難以分離的細胞可以放置在37°C以促進擴散。 4、加入6～8毫升的完整生長培養基，輕輕吸液，抽吸細胞。 5。去除胰酶EDTA溶液，將細胞懸液到離心管和旋轉約5 1000rpmfor 10分鐘。 6、低溫保存培養液中的上清液和復蘇細胞。 7、將細胞轉移至低溫瓶，1ml／瓶。 8、低溫容器中的細胞Frozen（NalgENα5100-01）。